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电泳实验对水质的要求?

更新时间:2026-08-17点击次数:14

 电泳依靠电场驱动核酸、蛋白分离,水中离子、有机物、核酸酶、内毒素会造成条带拖尾、弥散、无条带、背景过脏等问题,实验结果直接失效。依据GB/T 6682-2008《分析实验室用水规格和试验方法》ASTM D1193 试剂水标准,区分不同电泳场景水质标准:

       一、水中杂质对电泳的核心干扰

       1、金属离子(钙、镁、钠、硅):提升缓冲液电导率,电泳发热严重、条带扭曲漂移;硅离子会吸附核酸,造成 DNA/RNA 回收量大幅下降。

       2、总有机碳 TOC、有机物:凝胶背景荧光高,干扰核酸染料成像;蛋白电泳出现杂带、非特异性染色。

       3、核酸酶、细菌、内毒素:降解 RNA、低浓度 DNA;蛋白变性、抗原失活,RNA 电泳直接无清晰条带。

       4、颗粒物:凝胶出现黑点、气泡,影响条带识别。

       二、不同电泳类型水质标准对照表(25℃)

       结合国标 GB/T6682 与 ASTM D1193,分场景明确硬性指标:

电泳类型 适用纯水等级 电阻率 TOC 关键管控杂质

普通琼脂糖DNA电泳(常规质粒)

二级纯水(Type II)

≥1MΩ.cm <50ppb 低离子、无大量颗粒物
高分辨 PAGE、RNA 电泳、微量核酸

一级超纯水(Type I)

18.2 MΩ.cm <10ppb 无DNase/RNase、内毒素<0.002 EU/ml、0.2μm终端过滤
SDS-PAGE 蛋白电泳、Western 缓冲液配制 一级超纯水 18.2 MΩ.cm <10ppb 低内毒素、低重金属
凝胶模具清洗、设备润洗 三级RO纯水 ≥0.2 MΩ.cm 无严格限制 仅去除大颗粒杂质

       三、四类常见实验室用水对比(电泳适用性)

       1、自来水 / 普通蒸馏水:禁用。残留大量离子、挥发性有机物、微生物,电泳条带严重拖尾,仅可粗洗器皿。

       2、去离子水:仅临时应急普通 DNA 电泳,无有机物去除能力,存放易滋生核酸酶,不推荐 RNA、蛋白实验。

       3、二级纯水(反渗透 + 离子交换):满足常规琼脂糖 DNA,性价比高,无法去除微量核酸酶,不能用于 RNA、微量蛋白检测。

       4、一级超纯水(RO+EDI + 紫外 + 超滤):全品类精密电泳标配,去除离子、有机物、核酸酶、热源,适配 RNA、PAGE、微量核酸实验。

       四、实操使用关键注意事项

       1、超纯水现取现用:接触空气吸收CO₂,电阻率快速下降,缓冲液必须当场配制。

       2、RNA电泳需额外DEPC处理或选用无酶超纯水,灭活 RNase。

       3、储存容器禁用普通塑料桶,离子、塑化剂会二次污染纯水。

       4、长期实验建议配备0.2μm终端超滤,拦截细菌与颗粒物。

       水质不达标会直接导致电泳数据不可重复、实验报废,严格遵循国标与ASTM 试剂用水标准是实验稳定的基础。优普全系纯水设备可一机产出三级清洗纯水、二级常规纯水与达标一级超纯水,搭载紫外灭菌、终端超滤模块,出水指标匹配电泳各类实验需求,在线实时监测电阻率、TOC数值,水质全程可追溯,从源头规避离子、酶类、热源污染问题,适配分子、蛋白实验室长期稳定电泳检测使用。